原位雜交技術(shù)（In situ hybridization，ISH）是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細(xì)胞學(xué)相結(jié)合而產(chǎn)生的一門(mén)新興技術(shù)，以下是該技術(shù)的原理及分類(lèi)：基本原理
原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列，將有放射性或非放射性的外源核酸（即探針）與組織、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成專(zhuān)一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來(lái)。
技術(shù)分類(lèi)
RNA原位雜交：又稱(chēng)RNA原位雜交組織化學(xué)，是指運(yùn)用cRNA或寡核苷酸等探針檢測(cè)細(xì)胞和組織內(nèi)RNA表達(dá)的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是：在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下，用標(biāo)記的已知的RNA核苷酸片段，按核酸雜交中堿基配對(duì)原則，與待測(cè)細(xì)胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合（雜交），所形成的雜交體經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。
基因組原位雜交（Genome in situ hybridization，GISH）：利用物種之間DNA同源性的差異，用另一物種的基因組DNA以適當(dāng)?shù)臐舛茸鞣庾瑁诎腥旧w上進(jìn)行原位雜交。
熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）：在已有的放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非放射性DNA分子原位雜交技術(shù)。它利用熒光標(biāo)記的核酸片段為探針，與染色體上或DNA顯微切片上的特異序列進(jìn)行雜交，通過(guò)熒光檢測(cè)系統(tǒng)（熒光顯微鏡）檢測(cè)信號(hào)DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列，進(jìn)而確定其雜交位點(diǎn)。FISH技術(shù)檢測(cè)時(shí)間短，檢測(cè)靈敏度高，無(wú)污染，已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測(cè)等領(lǐng)域。
多彩色熒光原位雜交（Multicolor fluorescence in situ hybridization，mFISH）：在FISH技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新技術(shù)，它用幾種不同顏色的熒光素單獨(dú)或混合標(biāo)記的探針進(jìn)行原位雜交，能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶位，各靶位在熒光顯微鏡下和照片上的顏色不同，呈現(xiàn)多種色彩。
